16.07.2019

2 типа определение днк типирование. Днк в криминалистике и науке. Какие существуют типы ВПЧ


ВПЧ типы (вирус папилломы человека) проявляются поражением кожи и слизистых оболочек различными наростами: папилломами и бородавками. Это является следствием проникновения в организм папилломавируса. Ошибочно думать, что только внешними и внутренними новообразованиями воздействие вируса на организм человека ограничится. Некоторые типы папиллом могут привести к возникновению злокачественных опухолей. Поэтому главная цель - соблюдать бдительность при обнаружении на теле необычных наростов.

ВПЧ типы известны были предкам ещё в первые века нашей эры. Древние лекари с точностью определяли, что такие наросты передаются от больного человека к здоровому половым путём. То, что причиной появления бородавок и папиллом является вирус, учёные смогли доказать только в начале прошлого века.

Этот вирус относится к роду папиломавирусов, передаётся при контакте с живым организмом через верхний слой кожи, где и размножается внутри клеток и слизистых оболочек, вызывая изменения по типу бородавок и папиллом.

Во внешней среде вирус может существовать недолго, есть примеры, когда возбудителя можно «подхватить» в сауне или бане, так как он прекрасно чувствует себя во влажной среде. Весь его жизненный цикл совершается внутри клеток донорского организма. Он может находиться долгое время в клетках кожи, вызывая их неправильное деление.

Папилломавирус является одним из распространённых, передаётся при половом контакте. Число заражённых этим вирусом людей растёт с каждым годом. На сегодня около 90% населения мира является носителем папилломавируса. Главная опасность данного вируса в том, что, долго находясь в организме, некоторые его типы провоцируют онкологические заболевания.

Типы вируса

Типы вируса папилломы человека сегодня представлены очень широко. ВПЧ типирование насчитывает более ста разновидностей.

Разные типы новообразований, вызванных ВПЧ, вызывают в организме изменения, которые проявляются внешне и внутренне. Многие из них для человека не опасны, но есть такие, которые, долгое время находясь в организме человека, могут перерождаться в злокачественные опухоли.

В зависимости от возможности вызывать рак в организме, выделяются следующие типы вирусов:

  • не переходящие в онкологическое заболевание (1-5,10, 28,49);
  • редко вызывающие онкологию (6, 11, 13, 32, 34, 40-44, 51, 72);
  • средний процент онкоперерождения (26, 30, 35, 52, 53, 56, 58, 65);
  • высокий процент образования раковых опухолей (16, 18, 31, 33, 39, 45, 50, 59, 61, 62, 64, 68, 70, 73).

Последняя группа особенно опасна для женщин, так как часто вызывает рак шейки матки. Самые опасные типы, вызывающие рак в 94% случаев, – это 16, 18, 45.

Особое внимание должны уделить своему здоровью люди, у которых выявлены типы папиллом 56 и 66, способные привести к развитию особого вида рака – карциномы.

Данная классификация на основании исследований учёных меняется. Так произошло с типом 58, который из последней группы перешёл в предпоследнюю.

Если человек является носителем ДНК вируса папилломы, то он должен регулярно наблюдаться у врача-онколога, проходить обследование и сдавать необходимые анализы.

Онкогенные типы

Исходя из того факта, что некоторые типы ВПЧ могут быть онкоопасными, специалисты их разделили на несколько групп, показывающих возможный риск развития злокачественной опухоли:

  • безопасные;
  • с низким риском;
  • с высоким риском.

Большие опасения вызывает последняя группа. В этом случае можно наблюдать папилломы и остроконечные кондиломы, поселившиеся на репродуктивных органах представителей обоих полов. При их обнаружении посещение онколога обязательно. Врач назначит дифференцированное определение ДНК ВПЧ и после этого примет решение об удалении таких наростов.

Анализ на ВПЧ у женщин, заболевших раком шейки матки, показывает наличие 16 и 18 типа. Они бывают обнаружены у двух из трёх заболевших женщин.

Если анализ крови показывает наличие вируса папилломы человека онкогенного типа, это совсем не значит, что злокачественная опухоль обязательно разовьётся. ВПЧ у женщин может повысить риск развития опухоли. Поэтому при соответствующем своевременном лечении здоровью ничего не угрожает.

Кроме рака репродуктивных органов, ВПЧ онкогенного типа может поразить мочевой пузырь у мужчин. При этом вирус подавляет гены эпителия мочевыводящих путей, провоцируя их перерождение в злокачественную опухоль.

Диагностика симптомы заболевания

Медицинская наука сегодня имеет на вооружении методы, позволяющие точно определить, какая разновидность вируса вызвала появление новообразований на теле пациента.

Среди них часто применяются следующие методы:

  • Визуальное обследование. Одним из клинических проявлений является наличие на теле пациента папиллом, кондилом, бородавок. Если они имеются на репродуктивных органах и в зоне анального отверстия, назначаются дополнительные исследования.

  • Биопсия (кольпоскопия). Назначается при проблемах с тканями шейки матки. Для процедуры берётся уксусная кислота и раствор Люголя для обработки. При наличии ДНК папилломавируса на заражённом участке образуется характерный рисунок.
  • Цитология. Анализ мазков при помощи ПАП-теста. Дополнительно проводится гистология.
  • ПЦР (полимеразная цепная реакция). Способ хорош тем, что кроме самого вируса обнаруживает генотипирование ВПЧ. Данный анализ также выявляет быстротечные само излечивающиеся типы ВПЧ.

Последнее исследование должно включать пробы на все 15 онкогенных типов вируса. Хотя в нашей стране из них активны десять.

Если результаты диагностики говорят о наличии вируса в крови и дисплазии шейки матки, метод ПЦР с большой вероятностью обнаружит риск развития онкозаболевания.

Симптомы заболевания

Большей частью папилломавирус в организме носителя находится в бессимптомной форме. Этому способствует иммунитет, который подавляет все проявления.

Когда иммунитет слабеет, все типы вируса сразу активируются. Они собираются вместе и начинают воздействовать на клетки кожи. Нормальное воспроизводство нарушается, процесс деления клеток кожи ускоряется.

Как следствие этого появляются разные наросты. Именно они при визуальном осмотре говорят об инфицировании папилломавирусом.

В зависимости от типа, могут появляться следующие виды наростов:

  1. Бородавки. Круглые, плотные наросты до 1 см в диаметре, с чётко очерчёнными границами, шершавой поверхностью, разного цвета. Находятся на открытых местах. Не опасны для человека.
  2. Папилломы. Мягкий нарост на ножке цвета кожи, с шершавой поверхностью. Любит влажные места на теле. Размножаются очень быстро. Некоторые типы опасны.
  3. Кондиломы. Похожи на папилломы. Находятся в области наружных репродуктивных органов и заднего прохода. Размножаются быстро, образуют целые грозди. Опасны для человека.

Заражение вирусом происходит при половом контакте. Признаки могут появиться не сразу, а даже спустя полгода.

Попав в организм, вирус проходит четыре стадии:

  • латентное течение - изменений в организме нет, наличие вируса покажет только анализ;
  • появление клинических признаков - среди них наросты на коже;
  • дисплазия - вирус проникает в клетки, и они начинают изменяться, тип вируса покажет гемотест;
  • карцинома - клетки мутируют, появляется злокачественная опухоль.

Возможные заболевания

ДНК типирование ВПЧ 27 типов обуславливает разные заболевания, которые могут появиться у человека после заражения.

Среди таких заболеваний можно выделить следующие:

  1. Разные виды бородавок. Инфекция попадает бытовым путём. Подвержены ей дети и молодые люди. Иммунитет обычно справляется. Подошвенные бородавки излечиваются хирургическим путём.
  2. Остроконечная кондилома. Поражает половые органы.
  3. Эпидермодисплазия. Плоские бородавки розового цвета, вызывают рак кожи.
  4. Ларингеальный папилломатоз. Присущ новорожденным детям. Затрудняет дыхание.
  5. Бовеноидный папулёз. Характерен для мужчин, поражает слизистую.

Особое внимание надо обратить на признаки заболевания беременным женщинам, так как вирус может попасть к малышу во время родов.

Лечение и профилактика

Большинство наростов сходят сами в течение нескольких лет. При этом в организме на перенесённый тип вируса вырабатывается иммунитет, который остаётся на всю жизнь. Лечение при данном заболевании включает два этапа: применение противовирусных препаратов и удаление хирургическим путём.

Лекарственная терапия включает такие препараты: Салициловая кислота, Блеомицин, Имиквимод, Ретиноиды, Эпиген, Ферезол, Подофиллотоксин, Солкодерм.

Для удаления применяется криотерапия, лазеротерапия.

Существует также большая группа препаратов народной медицины. Это чистотел, одуванчик, каланхое, лук, алое, лимоны, полынь, клюква и др. Из них готовятся отвары, настойки, аппликации, втирания, используется сок, мякоть и т. д.

Для того чтобы предупредить заражение, применяются профилактические меры, а также вакцинация.

К мерам профилактики относятся:

  • обеспечение безопасной половой жизни;
  • регулярное посещение врача;
  • здоровый образ жизни;
  • вакцинация.

Если принять меры по предупреждению заболевания, то можно никогда не узнать на себе, что такое папилломавирус человека.

Сегодня изучено более ста разновидностей вируса ВПЧ, половина из них вызывает развитие образований на кожных покровах и слизистых оболочках интимных органов человека. Статистика говорит о том, что 80% населения Земли инфицировано. Это значит, что в клетках организма содержится ВПЧ разной степени онкогенности.

Наличие папилломавируса у пациента может привести к развитию серьезных осложнений, сложно предугадать, как поведет себя тот или иной тип возбудителя. Вот почему так важно знать особенности каждого генотипа, дабы эффективно вести борьбу с этой инфекцией.

Многие типы вируса папилломы человека являются совершенно безопасными для их носителя, возникают незначительные папилломы и бородавки, которые успешно устраняются косметологическими методами.

Другие типы папиллом относятся к онкогенной группе, провоцируют активное видоизменение клеток, что ведет к диагностированию рака у носителя. Разделение ВПЧ по типам позволяет разработать максимально правильную тактику лечения, на основе анализов на выявление микроорганизмов.

Человек может быть носителем нескольких ДНК ВПЧ, вирусы могут стабилизироваться, прекратить свое размножение или наоборот – процесс развития онкогенных клеток будет прогрессировать, а это значит, что остановить их негативное влияние на организм будет сложно.

Онкогенная группа

Генотипирование ВПЧ – важная процедура в диагностике выявления заболевания, это дополнительная возможность прогнозировать протекание нарушения. Всего в практической медицине подразделение папилломавируса происходит по трем группам.

  1. Безопасные вирусы, не вызывают развитие рака, а значит, паниковать не стоит, главное, в дальнейшем не стать носителем других инфекций, регулярно сдавать анализы на обнаружение инфекции и не запускать состояние иммунной системы.
  2. Низкая степень вероятности развития раковых клеток при выявлении папилломавируса 6,11,42- 44. В редких случаях может произойти мутации клеток, видоизменяясь в онкогенные.
  3. Самая опасная группа, у женщин повышается риск развития ракового процесса, у мужчин – причина рака мочевого пузыря. Это ВПЧ 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 59, 68.

Повышенное внимание к состоянию своего здоровья должны уделять пациенты с папилломавирусами 66 и 56, чаще всего такое носительство инфекции протекает бессимптомно, а потому выявить заболевание проблематично. Для каждого типа вируса важно проследить за признаками ВПЧ, провести специальное обследование и при необходимости начать квалифицированное лечение.

Особенности каждого типа вируса

Классификация вирусов помогает определить степень сложности заболевания, которое может спровоцировать такая инфекция. Обычные бородавки вызываются вирусом 2 типа, передается бытовым путем, при контакте с носителем, чаще всего страдают дети и подростки.

Защитные силы организма позволяют справиться иммунной системе с инфекцией, образования исчезают бесследно, главное не травмировать кожу в месте развития папиллом, дабы не вызвать вторичное заражение.

При инфицировании ВПЧ 3 и 5 появляются небольшие наросты на лице и ладонях. Такие высыпания еще называют юношескими, а значит, организм может самостоятельно справиться с этой инфекцией без медикаментозного вмешательства.

При обнаружении подошвенных бородавок можно уверенно говорить про наличие в организме папилломавируса 1 и 2 типов. Чаще всего страдают женщины, из-за ношения узкой обуви на высоком каблуке. Кожа на бородавке со временем утолщается, наросты размножаются по телу.

Образования ВПЧ 1 типа прорастают внутрь, доставляют дискомфорт при ходьбе, ноют и болят, особенно ночное время. Папилломавирус второго генотипа проявляется мозаичными наростами, которые не вызывают болевых ощущений, только эстетический дискомфорт.

Остроконечные кондиломы у женщин располагаются на слизистых оболочках половых органах и гениталиях, а у мужчин – на головке пениса и крайней плоти. Это опасные вирусы 6 и 11 типа.

Если обнаружен папилломавирус с малым онкогенным риском, это значит, что речь идет о присоединении инфекции 20, 21, 14, 25, 27 типа. Чаще всего это доброкачественные образования, не имеющие рецидивного характера.

Во время родовой деятельности матери ребенок может заразиться ларингеальным папилломатозом, ВПЧ типа 11. Такая форма заболевания наблюдается у детей до пяти лет, при обильном обнаружении образований может возникнуть риск удушья.

Определение опасности 16 и 18 типа ВПЧ

С помощью анализа гемотест можно сделать наиболее точный прогноз протекания болезни, значит выявить сразу несколько генотипов вируса, поставить правильный диагноз и начать своевременное лечение.

Если обнаружено сочетание 16 и 18 типов, то это будет свидетельствовать о наличии высокой степени онкогенности - потребуется кольпоскопическое обследование.

Благодаря гемотесту ВПЧ можно исключить возможность рецидива с летальным исходом.

При диагностировании женщин с раком шейки матки можно точно сказать, что причиной мутации является вирус 16 типа. Под воздействие благоприятных факторов (ослаблению иммунной системы, наличия других инфекций половых органов) папилломавирус начинает свое губительное воздействие на клетки, меняя их ДНК.

Это значит, что вирус генотипа 16 влияет на развитие предракового состояния, вызывает дисплазию шейки матки, обильно формируются папилломы и кондиломы по всему телу пациентки. У мужчин эти опасные штаммы вируса способны вызывать болезнь Боуэна, повреждение слизистой оболочки полового органа.

Благодаря высокоразрешающему анализу на ДНК ВПЧ (27 типов) можно выявить опасные патологические видоизменения в организме, вызваны наличием различных типов вируса папилломы.

При дисплазии шейки матки помимо 16 и 18 вируса еще встречаются 32, 30, 57, 61 и другие онкогенные типы. Если во время обследования анализы подтвердили наличие только одного типа ВПЧ высокого риска, а наростов при этом нет, это значит, что можно говорить о самоудалении инфекции из организма.

Другие типы накожных наростов

ВПЧ 49 штамма проявляется разрастаниями одиночных плоских образований, которые можно легко удалить с помощью лазерного аппарата. Этот генотип не является онкогенным, вторично не возникает.

Обнаружение вируса 57 штамма у женщины свидетельствует о предраковом состоянии пациентки, если имеются наросты на лице, то они удаляются с помощью импульсного потока, после чего не остается следов и рубцовой ткани.

Наросты ВПЧ 27 типа у мужчин и женщин можно убрать жидким азотом, появление вторичной инфекции исключено. Штаммы с номерами 51, 52, 56 являются онкогенными, а это значит, что дальнейшие изменения в структуре ДНК может стать причиной появления рака.

У мужчин развитие онкологии полового органа и анального отверстия. Только своевременная медикаментозная терапия может замедлить эти процессы и оставить губительное деление клеток ДНК.

ВПЧ 37 типа выступает одной из причин развития кератоакантомы, что свидетельствует о возникновении доброкачественной опухоли на коже, места локализации – лицо, открытые участки тела, в исключительных случаях – закрытые зоны.

Анализы на выявление ВПЧ 38 типа могут свидетельствовать о развитии меланомы, это злокачественные наросты, которые отличаются агрессивностью и стремительным фактором развития, а это значит, что игнорировать симптоматику нельзя, так как заболевание может оказать негативное влияние на все органы и системы человека.

Анализ на ВПЧ разновидности

Существует несколько лабораторных методик, которые с точностью смогут определить, сколько штаммов вируса присутствуют в организме мужчины и женщины. Для этого применяются такие виды диагностики как полимерная цепная реакция, анализ генотипирования. ПЦР проводится для определения типа вируса, а результаты этого исследования имеют вид таблицы со списком видов ВПЧ, пометками обнаруженных из них и указанием вирусной нагрузки.

Материал для анализа у женщин – мазок из цервикального канала. При беременности анализ на папиллому проводить необязательно, потому что нет угрозы для матери и плода. Мужчинам при подозрительных образованиях нужно обратиться к урологу. Только такое особое внимание к своему здоровью поможет избежать серьезных последствий для женщин после инфицирования организма.

Когда нужно делать диагностику ВПЧ женщинам?

Не стоит допускать ярко выраженные симптомы заболевания, важно регулярно проходить профилактический осмотр у гинеколога один-два раза в год, обязательно сдавать анализы на выявление инфекции после первого года половой жизни.

Заключение

Все классификации выявления ВПЧ в организме претерпевают изменения, ведь вирусы мутируют, вызывают осложнения, не поддаются лечению, повторно возникают после удаления, усложняется процесс диагностирования и расшифровки анализов.

Специфика подобных новообразований еще до сих пор точно не изучена, сколько еще времени потребуется, чтобы снизить риск опасности после заражения онкогенными штаммами и полностью удалить вирус из организма неизвестно.

Для пациентов с любым типом ВПЧ требуется индивидуальный терапевтический подход, чтобы успешно приостановить распространение вируса в организме нужно регулярно обследоваться у профильных специалистов, соблюдать указанные рекомендации, вести здоровый образ жизни.

Главная опасность ВПЧ для женщин и мужчин – это образование злокачественной опухоли, потому такая классификация вируса производится с учетом степени его онкологической опасности.

Берегите себя и будьте здоровы!

Даже если две раковые клетки выглядят под микроскопом одинаково, они могут быть очень разными, потому что в них произошли разные мутации, у них различается молекулярно-генетический профиль. За счет этого они будут по-разному себя вести и неодинаково реагировать на одно и то же лекарство.

Генетическое типирование помогает составить «молекулярный портрет» опухоли, подобрать наиболее эффективные препараты, назначить оптимальную схему лечения для конкретного случая. Такой подход не просто позволяет выиграть драгоценное время, он помогает сделать лечение персонализированным, повышает шансы на успех при разных видах рака.

При помощи современных технологий можно проанализировать большинство лекарственных препаратов и наиболее распространенные онкозаболевания. В итоге врач понимает, какое лечение принесет наилучший эффект у конкретного пациента.

Тест OncoDEEP - это комплексное молекулярно-генетическое исследование, в котором сочетаются самые современные технологии: Секвенирование Следующего Поколения (NGS) ИГХ, FISH, анализ метилирования, транслокаций, и многое другое. Материал для исследования получают при помощи классической (образец ткани опухоли) или жидкостной (образец крови) биопсии.

OncoDEEP позволяет определить чувствительность опухоли к разным видам терапии и подобрать персонализированное лечение, сопоставив результаты с данными мировой литературы и доказательной базы.

В настоящее время генетическое типирование успешно применяют для подбора лечения при меланоме, раке молочной железы, толстой и прямой кишки, яичников, легкого, а также при ряде других онкозаболеваний.

Мы помогаем онкологам и химиотерапевтам составить максимально эффективный план лечения посредством трехэтапной диагностики:

  • биопсия опухоли;
  • анализ крови;
  • подключение к платформе обработки и анализа данных, получаемых от врачей и пациентов со всего мира.

Данная платформа позволяет получить персонифицированное заключение, в котором отражена взаимосвязь терапии и генного ответа как реакции на назначенное лечение. Это дает врачу возможность быстро получать обратную связь и менять протокол в соответствии с полученной информацией.

Молекулярно-генетическое типирование помогает:

  • повысить эффективность химиотерапии и таргетной терапии;
  • более точно прогнозировать поведение опухоли и процесс метастазирования;
  • сэкономить время.

Для кого предназначено генное типирование?

Для взрослых пациентов с обширным опухолевым процессом всех типов. Метод помогает повысить эффективность терапии в следующих случаях:

  • если лечение уже проводилось, но не дало результатов;
  • при метастатических опухолях;
  • при редких, агрессивных типах рака.

Какие технологии применяются?

Исследование проводится на одном из двух видов препаратов:

  • FFPE-блоки - фиксированные в формалине и парафинизированные образцы тканей;
  • Микропрепараты - предметн6ые стекла с образцами ткани.

В медицинском центре «Медицина 24/7» есть оборудование, которое позволяет проводить все необходимые исследования с использованием новейших технологий биосеквенирования в сочетании с иммуногистохимическим исследованием и анализом биомаркеров, специфичных для данного вида опухоли.

➜ Ко всем анализам

Стоимость:

*без учета забора материалов

Срок выполнения (раб.дн.)

Время сдачи**

Весь день по графику работы медцентра

Методика

не обнаружено

Материал

урогенитальный соскоб

** График сдачи и условия подготовки актуальны только для данного анализа. Если необходимо сдать несколько анализов - рекомендуем уточнить график и условия по телефону колл-центра.

*** Обращаем ваше внимание, что сроки выполнения анализов могут быть увеличены по техническим причинам, связанным с особенностями биоматериала (гемолизированные, хилезные образцы, наличие сгустков и т.д.), что требует перестановок, а в некоторых случаях повторного забора материала.

Номенклатура

Human papillomavirus, HPV, вирус папилломы человека, ВПЧ

Описание

ВПЧ - наиболее часто встречающаяся инфекция, передаваемая половым путем. Преимущественно поражает эпителий, стимулирует его разрастание и приводит к образованию кондилом, бородавок, эрозиям. Известно более 100 типов вируса папилломы. Возможно носительство одновременно нескольких типов вируса у одного человека.

Некоторые типы вируса (онкогенные) при встраивании в геном клеток эпителия (интеграция) могут вызывать их злокачественное перерождение, приводя к раку. Самым опасным считается носительство ВПЧ 16 и 18 типов, поскольку оно с высокой долей вероятности приводит у женщин к развитию рака шейки матки.

Способ передачи

Контактный (при генитально-генитальных, генитально-оральных, генитально-анальных контактах), вертикальный (от матери ребенку), бытовой.

Инкубационный период

Составляет от нескольких недель до нескольких лет.

Особенности теста

Анализ инфекции с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволяет проводить чувствительное и специфичное определение наличия возбудителя, а также определяет его типы.

ДНК-ТИПИРОВАНИЕ (молекулярно-генетическая индивидуализация организмов, ДНК-индивидуализация), способ исследования генетического материала, направленный на выявление и оценку индивидуальных генетических особенностей биологического объекта. Цель такого исследования - установление сходства (или различий) разных организмов для определения степени их родства.

Метод ДНК-типирования основан на существовании различий в структуре ДНК у разных индивидуумов. Это касается так называемых гипервариабельных участков, обладающих структурным полиморфизмом (имеют несколько аллельных форм). В их формировании главную роль играют относительно короткие нуклеотидные последовательности, получившие название минисателлитные и микросателлитные ДНК, состоящие соответственно из 15-70 и 2-5 пар нуклеотидов. Эти последовательности рассеяны по геному в виде блоков (локусов) и имеют тандемную организацию (многократно следуют друг за другом). Число тандемных повторов (и, следовательно, длина самих локусов) варьирует в пределах от 2-4 до нескольких тысяч. Наличие повторяющихся элементов в таких гомологичных сателлитных блоках и обусловливает структурный полиморфизм этих локусов, проявляющийся, в частности, как феномен полиморфизма длины рестриктазных фрагментов (ПДРФ). Такие фрагменты образуются после ферментативного расщепления ДНК рестриктазами (внутри повторов расщепления не происходит из-за особенностей их нуклеотидного состава). В первоначальных вариантах ДНК-типирование фрагменты ДНК разделяли электрофорезом в агарозном геле, а затем получали отпечаток этого геля на мембранном фильтре. Последний инкубировали в растворе, содержащем специально подобранные зонды - фрагменты ДНК, меченные радиоизотопом. Содержащие комплементарные зонду участки исследуемой ДНК связывались (гибридизовались) с ним и выявлялись с помощью радиоавтографии. Таким образом на радиочувствительной плёнке в виде набора полос идентифицировались сразу все микро- и минисателлиты геномной ДНК, гомологичные используемому зонду. По аналогии с анализом дактилоскопического оттиска (рисунком папиллярных линий) появился термин «генетическая, или геномная, дактилоскопия». Каждый индивидуум имеет свой геномный «отпечаток», который характеризуется определённым числом полос (до нескольких десятков), их расположением на дорожке и интенсивностью почернения каждой из полос. Чем больше родство, тем больше совпадений. Вся картина обнаруживает даже более высокую индивидуальную специфичность, чем папиллярные узоры, и поэтому может служить «генетическим удостоверением» личности. У кровных родственников число совпадающих полос заметно больше, у близнецов они идентичны.

Разработка метода (конец 1980-х годов) полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволила размножать (амплифицировать) любую последовательность ДНК, получать десятки и сотни миллионов её копий и использовать для молекулярно-генетического анализа исчезающе малые количества биологического материала. Появилась возможность сравнивать длину отдельных целых локусов минисателлитных ДНК, не подвергая их предварительному ферментативному расщеплению, т. е. осуществлять анализ полиморфизма длины амплифицированных фрагментов (ПДАФ). После разделения продуктов ПЦР электрофорезом их положение в геле выявляют с помощью специальных красителей, флуоресцентных меток и др. Разработаны также так называемые мультиплексные амплификационные системы, которые позволяют одновременно анализировать ПДАФ сразу нескольких локусов (их может быть более десяти). В этом случае амплификационный профиль ДНК, создаваемый уже суммой локусов, оказывается чрезвычайно полиморфным (является комбинацией нескольких независимых полиморфных элементов), но обеспечивает очень высокую достоверность анализа.

Вариабельность в структуре полиморфных генов мини- и микросателлитных ДНК может быть обусловлена также точечными нуклеотидными заменами. Такие локусы различаются только по нуклеотидному составу. В этом случае определяют первичную структуру амплифицированных фрагментов (смотри Секвенирование). Наиболее разработанным методом ДНК-типирования, основанным на секвенировании фрагментов, является анализ митохондриальной ДНК (мтДНК), которая характеризуется высоким уровнем полиморфизма, наличием большого числа копий, отсутствием рекомбинации и материнским характером наследования (зародыш получает митохондрии только из яйцеклетки). Всё это позволило широко использовать мтДНК в популяционных и филогенетических исследованиях, а в некоторых случаях сделало её единственно возможным инструментом для ДНК-типирования; например, когда ДНК, содержащаяся в образце, сильно деградирована, а хромосомная ДНК не может быть амплифицирована. Наследование по материнской линии и отсутствие рекомбинации позволяют использовать мтДНК в качестве так называемого «трассирующего» родословного генетического маркера. Это особенно важно при установлении родства в тех случаях, когда генетическая дистанция, разделяющая родственников, оказывается больше, чем одно поколение. Ярким примером использования мтДНК для ДНК-типирования явилась работа российских, британских и американских учёных по идентификации останков российской императорской семьи в 1992-98 годах. Позднее анализ мтДНК был многократно использован для индивидуализации костных и мумифицированных останков, возраст которых исчисляется десятками, сотнями и даже десятками тысяч лет.

Методом ДНК-типирования пользуются в криминалистике для идентификации личности и установления родственных отношений, а также в медико-биологическом анализе. В генетике и селекции сельскохозяйственных животных и растений этот метод используют для паспортизации и отбора чистопородного потомства животных, типирования сортов растений, определения межвидовых и межсортовых различий, а в практической бактериологии и эпидемиологии - для идентификации бактериальных штаммов. ДНК-типирование можно использовать при изучении структурно-функциональных особенностей генетического аппарата и явлений геномной нестабильности при нормальном функционировании клеток и патогенезе, в популяционной и эволюционной генетике.

Лит.: DNA Fingerprinting: State of the science. В. а. о., 1993; Иванов П. Л. Молекулярно-генетическая идентификация останков царской семьи // Вестник РАН. 1994. Т. 64. № 10; он же. Использование индивидуализирующих систем на основе полиморфизма длины амплифицированных фрагментов (ПДАФ) ДНК в судебно-медицинской экспертизе идентификации личности и установления родства // Судебно-медицинская экспертиза. 1999. № 4; он же. Индивидуализация человека и идентификация личности: молекулярная биология в судебной экспертизе // Вестник РАН. 2003. Т. 73. № 12.




© 2024
womanizers.ru - Журнал современной женщины