Исследование жидкостей, добытых при помощи пробного прокола грудной и брюшной полостей, суставов, абсцессов и кист, ставит целью изучение свойств добытого пунктата. Данные этого рода исследования имеют большое диагностическое значение, во многих случаях решающее при определении характера болезненного процесса, вызвавшего скопление жидкости. Количество добытого пунктата при этом не имеет существенного значения. Оно важно лишь в прогностическом отношении. В то время как в одних случаях едва удаётся собрать лишь несколько кубических сантиметров выпота, в других - его можно удалять литрами. Вопрос о происхождении пунктата и характере заболевания в каждом отдельном случае по существу решается на основании данных исследования жидкости.
Путём пробного прокола грудной и брюшной полостей могут быть получены различного рода экссудаты, транссудаты, кровь, содержимое желудкаили кишечника, моча, содержимое различного рода кист и пузырей эхинококка.
Исследование пунктатов ставит задачей определение физических свойств жидкости, её химического состава, изучение форменных элементов, примешивающихся к выпоту, и, наконец, бактериологическое исследование.
При определении физических свойств обращают внимание на цвет выпота, его прозрачность, консистенцию, удельный вес и реакцию.
По внешнему виду различают выпоты: а) совершенно бесцветные, б) окрашенные в тот или другой цвет, в) прозрачные, г) опалесцирующие, д) мутные и е) молочно-белые.
Совершенно бесцветным и прозрачным, чистым, как вода, является содержимое пузырей эхинококка и мешётчатых опухолей - кист; к прозрачным, кроме того, относятся транссудаты и серозные экссудаты, а также моча, скопляющаяся в брюшной полости при разрыве мочевого пузыря. Цвет выпота и интенсивность его окраски при этом могут быть различными.
Серозные экссудаты и транссудаты представляют собой почти совершенно прозрачные, лишь слегка опалесцирующие жидкости, красивого лимонно-жёлтого цвета. Примесь небольшого количества красящего вещества крови придаёт им красноватый оттенок; при более резкой экстравазации жидкость становится красной и даже вишнёво-красной, по цвету не отличаясь существенно от крови.
К мутным жидкостям относятся серо-фибринозные, гнойные и ихорозные экссудаты, геморрагические экссудаты, скопляющиеся при туберкулёзных поражениях серозных оболочек, а также при злокачественных новообразованиях органов грудной и брюшной полости, содержимое желудка и кишечника и, наконец, геморрагические транссудаты, скопляющиеся в брюшной полости при тромбоэмболических коликах и некоторых формах илеуса.
Молочно-белыми являются экссудаты - хилёзные, хилусоподобные и псев-дохилёзные.
Молочно-белый цвет хилёзного экссудата, скопляющегося в брюшной полости при разрыве лимфатических сосудов полости, обусловливается примесью большого количества жира, при отстаивании скопляющегося в виде густой сметанообразной массы на её поверхности. После прибавления нескольких кубических сантиметров эфира, подщелочённого каплею едкого кали, жидкость, вследствие полного растворения жира, делается совершенно прозрачной. В обработанных Судан 111 препаратах при микроскопическом исследовании видна масса окрашенных в интенсивно красный цвет зёрнышек жира. При хроническом воспалении серозных оболочек, например, туберкулёзе, в полостях скопляются хилусоподобные экссудаты, характерная окраска которых зависит от скопления большого количества распавшихся жирно перерождённых клеток. Этого рода экссудаты содержат жира значительно меньше; после прибавления эфира жидкость, лишь несколько просветлевшая, остаётся мутной вследствие примеси большого количества взвешенных в ней эндотелиальных клеток и лейкоцитов.
Псевдохилёзные экссудаты, окраской напоминающие разбавленное молоко, содержат лишь очень небольшое количество жира. Они не просветляются после прибавления эфира и не образуют сливкоподобного слоя при отстаивании. Характерную их окраску одни объясняют присутствием лецитинсодержащих глобулинов, другие - нуклеидов и мукоидов.
По своей консистенции добытые путём прокола выпоты являются чаще всего совершенно жидкими; сюда относятся экссудаты, транссудаты, жидкость из эхинококкового пузыря, моча и т. д.; ясно слизистую консистенцию имеет лишь содержимое кист матки. Вследствие примеси большого количества псевдомуцина, пунктаты овариальных кист показывают ясно слизистую консистенцию и могут растягиваться в длинные тонкие нити. Содержимое матки, попадающее при её разрывах в брюшную полость, представляет собой густую, вязкую, растягивающуюся также в длинные нити массу. При микроскопическом исследовании в осадке обнаруживают много лейкоцитов и эпителиальных клеток.
При определении Удельного веса Пунктата обыкновенно пользуются Пробой Детре, Которая представляет собой лишь видоизменение пробы Гаммершляга. Определение при помощи ареометра не всегда удаётся вследствие быстрого свёртывания жидкости; кроме того, оно требует большого количества (до 25 куб. см) пунктата. Чтобы задержать свёртывание, рекомендуют собирать пунктат в сосуд, погружённый в подогретую до 38° воду. Исследование следует проводить с ареометрами, установленными для температуры в 36°.
В основе метода Детре лежит разница удельного веса основного раствора и исследуемой жидкости. Если опустить каплю выпота в жидкость более лёгкого удельного веса, она быстро опускается на дно, в растворе более тяжёлом капля плавает на поверхности. При тождестве удельных весов она оказывается взвешенной в растворе, плавает в нём, не поднимаясь и не опускаясь.
В качестве основных пользуются 4 растворами поваренной соли удельного веса 1,010 (1,380%), 1,020 (2,76%), 1,030 (4,14%) и 1,040 (5,52%). Основные растворы готовят на дестиллированной воде, прибавляя указанные количества поваренной соли. Удельный вес реактива должен быть выверен точно по ареометру. Вначале определяют концентрацию пограничных растворов. С этой целью одну каплю исследуемой жидкости опускают при помощи пипетки в разлитые по пробиркам основные растворы. Если в растворе с удельным весом 1,020 капля опускается на дно, а при удельном весе 1,030 плавает на поверхности, удельный вес исследуемой жидкости лежит где-то в пределах 1,020-1,030. Приготовив затем промежуточные концентрации путём соответствующего разведения раствора с удельным весом 1,030 дестиллированной водой (9+.1,8 + + 2,7 + 3 и т. д.), производят окончательное определение.
Удельный вес транссудата колеблется в пределах от 1,005 до 1,018. Самый высокий удельный вес обнаруживают в лунктатах при пневмотораксах, когда жидкость по своим свойствам стоит между транссудатами и экссудатами.
Экссудаты отличаются большею плотностью. Их удельный вес обычно выше 1,018. Однако различия в этом отношении между экссудатами и транссудатами далеко не всегда постоянны. Во многих случаях удельный вес экссудата оказывается ниже предельного, с другой стороны, встречаются нередко транссудаты с очень высоким удельным весом.
Реакция пунктата имеет большое значение при исследовании содержимого желудка и мочевого пузыря. Выпоты при водянках и воспалениях серозных-оболочек обыкновенно щелочной реакции. Наблюдающиеся при этом колебания концентрации водородных ионов очень непостоянны и не имеют существенного значения при диференцировке транссудатов от экссудатов. Содержимое желудка резко кислой реакции с кислым запахом и нередко содержит кровь; моча при разрыве мочевого пузыря у плотоядных чаще всего нейтральной, иногда кислой, реже заметно щелочной реакции.
Определение количества белка является основным моментом исследования выпота, так как в этом отношении установлены довольно значительные различия, помогающие диференцировать экссудаты от транссудатов. Наиболее точные результаты даёт метод взвешивания сухого осадка белка. Для осаждения пользуются 1 % раствором поваренной соли, подкисленной каплей уксусной кислоты. К 100 куб. см горячего раствора NaCl прибавляют 10 куб. см исследуемой жидкости и после основательного взбалтывания фильтруют; осадок промывают водой, подкисленной уксусной кислотой, спиртом, эфиром, высушивают в эксикаторе и взвешивают. Вычтя из общего веса вес фильтра и умножив полученную разность на 10, получают процентное содержание белка в жидкости.
Из более простых методов довольно точные результаты даёт способ Робертса - Стольникова (см. определение белка в моче). Так как удельный веспунктата зависит, главным образом, от количества растворённого в нём белка, его содержание в жидкости можно приблизительно вычислить по удельному весу при помощи формулы: х = аД (УД - вес - 1,000) - 2,88 для экссудатов Пх = г1я (УД - вес--1,000)-2,72 для транссудатов.
Наиболее простым и удобным методом, позволяющим определить не только общее количество белка, но и установить отношения между белковыми фракциями, является рефрактометрический способ.
Содержание белка в транссудатах, по сравнению с экссудатами, не особенно велико и обыкновенно ниже 2,5%. Только в редких случаях, как, например, при асцитах, водянках, вследствие пневмоторакса, количество его в транссудатах доходит до 3 и даже 4%. Содержание белка в экссудатах значительно выше 2,5 % и часто доходит до 4 и даже 5%. Такого рода соотношения помогают легко диференцировать воспалительные выпоты от механических. Однако нередко наблюдаются случаи, когда содержание белка в экссудате стоит несколько ниже указанной границы. Значительные услуги при оценке подобного рода выпота в таких случаях оказывает реакция Ривальта (Rivalt), а также Морица (Moritz).
Реакция Ривальта основана на выпадении особого белка, осаждаемого разведённой уксусной кислотой. Эта разновидность белковых веществ может быть установлена только в выпотах воспалительного характера. Транссудаты её совершенно не содержат. В качестве реактива применяют слабые растворы уксусной кислоты (2 капли на 100 куб. см дестиллированной воды). Техника крайне несложна. В узкий цилиндр ёмкостью 25 куб. см наливают 20 куб. см реактива. Затем при помощи пипетки наносят на его поверхность одну каплю исследуемой жидкости. В присутствии белка капля, медленно падая, оставляет облачко мути, причём на дне получается небольшой мутный осадок. Транссудаты быстро растворяются в реактиве, не давая помутнения.
Реакция Морица. К 2-3 куб. см пунктата добавляют несколько капель 5% уксусной кислоты. Экссудат даёт помутнение и осадок, транссудат - слабое помутнение.
На основании результатов этих проб, в тех случаях, когда нет резкой разницы по удельному весу и содержанию белка, можно точно диференцировать экссудат от транссудата.
Определение псевдомуцина. Содержимое овариальных кист представляющее собой желтоватую или грязно-коричневую вязкую жидкость с удельным весом от 1,005 до 1,050, отличается присутствием своеобразного белкового тел а -псевдомуцина. Псевдомуцин не осаждается ни уксусной, ни азотной кислотой, но выпадает в осадок под действием спирта. Однако эта разница не является доказательной, так как сывороточные белки - постоянная составная часть выпотов-также осаждаются алкоголем.
Для определения псевдомуцина к 25 куб. см пунктата прибавляют несколько капель спиртового раствора розоловой кислоты, подогревают до кипения и затем добавляют каплями п/10 раствора серной кислоты до слабо кислой реакции. Слегка пожелтевшую после этой обработки жидкость снова доводят до кипения и затем фильтруют. Полная прозрачность фильтрата указывает на отсутствие псевдомуцина.
Особенно большое значение при определении характера выпота и его происхождения придают микроскопическому исследованию осадка - Цитоскопии. Изучение морфологических элементов выпота не только даёт возможность отличать экссудаты от транссудатов, но вместе с тем позволяет иногда делать заключения и относительно этиологии заболевания, сопровождающегося скоплением выпота в полостях тела.
Для микроскопического исследования пользуются осадком, полученным путём центрифугирования. Чтобы удалить сгустки фибрина, которые значительно затрудняют исследование, жидкость лучше дефибринировать. С этой целью выпот помещают в толстостенную бутылку со стеклянными бусами и взбалтывают в течение 30-60 минут. Дефибринированную таким образом жидкость сливают в конические пробирки и центрифугируют до тех пор, пока пробная капля, взятая с поверхности, не будет больше содержать форменных элементов. Слив прозрачную жидкость, осадок осторожно размешивают при помощи стеклянной палочки. Полученную эмульсию используют для приготовления мазков и свежих препаратов.
Окрашивание свежих препаратов производят чаще всего 1 % водным раствором метиленовой синьки, одну каплю которого смешивают с каплей взятой эмульсии. Размешав осторожно смесь стеклянной палочкой, покрывают её покровным стеклом, удаляют фильтровальной бумажкой избыток жидкости, выступившей за край стёклышка, и немедленно исследуют. Под микроскопом легко различить крупные, рыхлые эндотелиальные клетки, компактные, с характерным ядром, белые кровяные тельца, безъядерные эритроциты, клетки различных новообразований и разнообразную микробную флору.
Свежие препараты приготовляют лишь для исследования ex tempore; они быстро портятся, сохранить их удаётся лишь при помощи особого рода консервирующих составов.
Гораздо удобнее в этом отношении сухие препараты, которые приготовляют, размазывая каплю эмульсии по поверхности предметного стекла.
После высушивания мазок фиксируется метиловым алкоголем и окрашивается по Гимза.
При оценке полученных результатов следует помнить, что реакция серозных оболочек на механические раздражения (транссудаты) выражается обильной десквамацией эндотелия; на пиогенные инфекции серозные оболочки отвечают нейтрофилией, для туберкулёза характерен лимфоцитоз.
В выпотах при сердечных и почечных заболеваниях поэтому обнаруживают громадное количество крупных эндотелиальных клеток, группирующихся в кучки по 5-10 клеток. Эти скопления иногда настолько обильны, что сплошь покрывают всё поле зрения. Их легко отличить от лейкоцитов по крупному, сильно вакуолизированному ядру, окрашивающемуся в фиолетовый цвет, и нежной розовой протоплазме, окружающей ядро толстым слоем. Кроме эндотелиальных клеток, в транссудатах обнаруживают большое количество эритроцитов, лимфоцитов и отдельные нейтрофилы.
При серозных плевритах и перитонитах, обусловленных действием пиогенных микробов, в экссудатах находят скопление большого количества сегмен-тоядерных и палочкоядерных нейтрофилов, а также эритроцитов. Эндотелиальные клетки и лимфоциты представлены скудно.
При туберкулёзных плевритах поле зрения покрыто массой мелких лимфоцитов, среди них встречаются отдельные клетки средней и крупной величины. К ним иногда в большом количестве примешиваются красные кровяные тельца. Нейтрофилы и эозинофилы представлены скудно. По Видалю, их количество не должно быть больше 10% общей массы лейкоцитов.
При злокачественных новообразованиях обнаруживают громадных размеров клетки с сильно вакуолизированной, часто перерождённой протоплазмой и крупным почковидным или овальным ядром, в котором можно заметить несколько (2-3) ядрышек. Этого рода клетки считаются специфичными для злокачественных новообразований.
Транссудатом называется жидкость невоспалительного происхождения, которая образуется вследствие пропотевания сыворотки крови через стенку сосудов в больше серозные полости (плевральную, брюшную, околосердечную) чаще при недостаточности кровообращения, а также при нарушении местного кровообращения.
Экссудат - жидкость, скапливающаяся в тех же полостях в результате воспалительного процесса. Воспалительный выпот наблюдается при туберкулезе, ревматизме, раке и некоторых других заболеваниях.
Определение физических свойств транссудатов и экссудатов
Определяют цвет, прозрачность, консистенцию, запах, удельный вес, характер выпота.
Транссудат и серозный экссудат прозрачны. Транссудат почти бесцветный или имеет бледножёлтый цвет. Серозный экссудат имеет различную окраску в зависимости от характера экссудата. Экссудат может быть следующего характера:
Серозный - прозрачная жидкость бдедно-желтого цвета.
Серозно-фибринозный - полупрозрачная жидкость, в которой при стоянии выпадает осадок,
Серозно-гнойный - мутная жидкость желтоватого цвета, гной, стоянии отмечается обильный осадок.
Гнойный - густая мутная жидкость желтовато-зеленого цвета. При примеси крови жидкость приобретает красно-бурый цвет.
Гнилостный - мутная желтовато-зеленая или буро-зеленая жидкость с гнилостным запахом.
Геморрагический - красного или буровато-коричневого цвета мутная жидкость.
Хилёзный - жидкость молочного характера с большим содержанием жира.
Псевдохилозный - имеет вид разбавленного молока без аира.
Консистенция выпота может быть жидкой, полужидкой, густой. Запах в большинство случаев отсутствует, неприятным запахом обладает только гнилостный экссудат.
Удельный вес жидкости определяют при помощи урометра. Полостную жидкость наливают в цилиндр, опускают урометр, чтобы он свободно в нем плавал. Транссудаты имеют более низкий удельный вес, чем экссудаты. Удельный вес транссудата колеблется в пределах I005-I0I5, удельный вес экссудата выше 1015. Характер выпота определяется путем оценки указанных сеойств с последующей проверкой при микроскопической исследовании.
Химическое исследование
Сюда относится определение белка. Белок в выпотных жидкостях определяется по методу Робертса-Стольннкова. Метод основан на том, что при наслаивании жидкости, содержащей белок, на 50% раствор азотной кислоты на границе двух жидкостей образуется белое кольцо, причем, если чёткое белое кольцо появляется на 3-ей минуте, то содержание белка разно 0,033% или 33 мг в 1000 мл жидкости.
Появление кольца раньше чем через 2 минуты свидетельствует о большом содержании белка в исследуемой жидкости, в этом случае экссудат следует развести физиологическим раствором или водой до появления тонкого белого кольца на 3-ей минуте. При разведении учитывают ширину кольца, его компактность, при этом каждое последущее разведение жидкости готовят из предыдущего. Определение кольца производят на черном фоне. Количество белка вычисляют, умножив полученное разведение на 0,033%. Содержание белка выражают в %. Белок в транссудате содержится в меньшем количестве, чем в экссудате, не более 3%(обычно 0,5-2,55%), а в экссудате свыше 3%:
По количеству белка МОЖНО судить,о характере выпота. Иногда содержание белка в транссудате доходит до 4%. Для отличия транссудата от экссудата в таких случаях пользуются реакциями открывающими особое белковое тело, серозомуцин, присущее только экссудатам.
Реакция Ривальта. В цилиндр емкостью 100-200 мл наливают дистиллированную воду, которую подкисляют ледяной уксусной кислотой (2 капли ледяной уксусной кислоты на 100 мл воды). В этот pacтвор опускают 1-2 капли исследуемой жидкости. Если жидкость - транссудат, то помутнения по ходу капли не будет, реакцию считают отрицательной; если жидкость - экссудат, то по ходу капли образуется беловатое облачко, в этом случае реакцию считают положительной.
Реакция Лукерини. На часовое стекло вносят 2 ил 3% раствора перекиси водорода, в нее добавляют I каплю исследуемой Жидкости, если появляется опалесцирующее помутнение, жидкость является экссудатом. Определение помутнения производят на черном фоне.
Микроскопическое исследование
Для изучения клеточного состава жидкость центрифугируют. Проводят микроскопическое исследование нативных и окрашенных препаратов, приготовленных из осадка.
Нативные препараты готовят следующим образом: на предметное стекло помещают кашпо отцентрифугированного осадка, накрывают покровным стеклом и изучают под микроскопом вначале под малым, а затем под большим увеличением. При исследовании нативного препарата можно обнаружить: лейкоциты в небольшом количестве обнаруживаются в транссудатах, значительно больше их в экссудатах, особенно большое количество лейкоцитоз отмечается при гнойных выпотах. Эритроциты в небольшом количестве Встречаются во всяком выпоте, большое количество ИХ наблюдается при геморрагических экссудатах.
Клетки мезотелия - крупные клетки, обнаруживаются в большом количестве в транссудатах, при сердечных и почечных заболеваниях. Б экссудатах - при злокачественных новообразованиях и туберкулезной этиологии их обычно немного.
Окрашенные препараты. Небольшую каплю осадка помещают на предметное отекло, готовят мазок. Мазок высушивают на воздухе, затем фиксируют или абсолютным метиловым спиртом - 5 минут, или смесью Никифорова (равные объемы 96% этилового спирта и эфира) - 15 минут. Фиксированные препараты окрашивают краской Романовского-Гимза в течение 10 минут, затем смывают краску, мазок высушивают и исследуют под микроскопом с иммерсионной системой. В окрашенных препаратах подсчитывают процентное соотношение отдельных видов лейкоцитов, исследуют морфологию других клеточных элементов. В окрашенных препаратах можно обнаружить:
нейтрофильные лейкоциты - преобладающие клетки гнойного экссудата. При серозном воспалении нейтрофиллы можно обнаружить в начальной стадии процесса;
лимфоциты - встречаются в экссудате любой этиологии, в большом количестве наблюдаются при туберкулезках плевритах. Небольшое количество встречается в транссудатах;
клетки мезотелия - крупные, разной формы, с одним или двумя ядрами. Цитоплазма мезотелия окрашивается в синий дает. Постоянно обнаруживаются в транссудатах, в экссудатах - в начальной стадии воспалительного процесса;
атипичные (опухолевые) клетки - различной величины и обычно крупные до 40-50 мкм. Ядро занимает большую часть цитоплазмы. В ядрах клеток обнаруживаются нуклеолы. Цитоплазма окрашивается базофильно.
Бактериоскопическое исследование
Сухие фиксированные мазки окрашиваются по Цилю-Нильсону. Методику окрашивания см.раздел "Исследование мокроты".
Для исследования на туберкулезные бактерии экссудат подвергают длительному центрифугированию или обработке способом флотации.
ПРиложение: Посуда, оборудование, реактивы..
I.Пробирки. 2.Пипетки. 3. Цилиндры для определения удельного веса выпотных жидкостей и проведения реакции Ривальта. 4. Часовые стекла для проведения пробы Лукерини. 5. Черная бумага. 6. Урометры. 7. Предметные и покровные стекла. 8. Спиртовые горелки. 9. Центрифуга. 10. Микроскопы. II. Набор для окрашивания по Романовскому-Гимза. 12. Набор для окрашивания по Цилю-Нильсону. 13. Ледяная уксусная кислота. 14. 50% раствор азотной кислоты. 15. 3% раствор перекиси водорода.
Экссудат
Экссудат (exsudatum; лат. exsudare – выходить наружу, выделяться) – жидкость, богатая белком и содержащая форменные элементы крови; образуется при воспалении. Процесс перемещения экссудата в окружающие ткани и полости организма называется экссудацией, или выпотеванием. Последняя возникает вслед за повреждением клеток и тканей в ответ на выделение медиаторов.
В зависимости от количественного содержания белка и вида эмигрировавших клеток различают серозный, гнойный, геморрагический, фибринозный экссудат. Встречаются также смешанные формы экссудата: серозно-фибринозный, серозно-геморрагический. Серозный экссудат состоит преимущественно из плазмы и небольшого числа форменных элементов крови. Гнойный экссудат содержит распавшиеся полиморфно-ядерные лейкоциты, клетки пораженной ткани и микроорганизмы. Для геморрагического экссудата характерно наличие значительной примеси эритроцитов, а для фибринозного – большое содержание фибрина. Экссудат может рассасываться или подвергаться организации.
Транссудат
Транссудат (лат. trans – через, сквозь + sudare – сочиться, просачиваться) – невоспалительный выпот, отечная жидкость, скапливающаяся в полостях тела и тканевых щелях. Транссудат обычно бесцветен или бледно-желтого цвета, прозрачный, реже мутноват из-за примеси единичных клеток спущенного эпителия, лимфоцитов, жира. Содержание белков в транссудате обычно не превышает 3%; ими являются сывороточные альбумины и глобулины. В отличие от экссудата в транссудате отсутствуют ферменты, свойственные плазме. Относительная плотность транссудата 1,006–1,012, а экссудата – 1,018–1,020. Иногда качественные различия между транссудатом и экссудатом исчезают: транссудат становится мутноватым, количество белка в нем возрастает до 4–5%). В таких случаях важное значение для дифференциации жидкостей имеет изучение всего комплекса клинических, анатомических и бактериологических изменений (наличие у больного боли, повышенной температуры тела, воспалительной гиперемии, кровоизлияний, обнаружение в жидкости микроорганизмов). Для отличия транссудата от экссудата применяют пробу Ривальты, основанную на разном содержании в них белка.
Образование транссудата чаще всего обусловлено сердечной недостаточностью, портальной гипертензией, застоем лимфы, тромбозом вен, почечной недостаточностью. Механизм возникновения транссудата сложен и определяется рядом факторов: увеличенным гидростатическим давлением крови и сниженным коллоидно-осмотическим давлением ее плазмы, повышенной проницаемостью капиллярной стенки, задержкой в тканях электролитов, преимущественно натрия и воды. Скопление транссудата в полости перикарда называют гидроперикардом, в брюшной полости – асцитом, в плевральной – гидротораксом, в полости оболочек яичка – гидроцеле, в подкожной клетчатке – анасаркой. Транссудат легко инфицируется, превращаясь в экссудат. Так, инфицирование асцита приводит к возникновению перитонита (асцит-перитонит). При длительном скоплении в тканях отечной жидкости развиваются дистрофия и атрофия паренхиматозных клеток, склероз. При благоприятном течении процесса транссудат может рассосаться.
Асцит
Асцит – накопление жидкости в брюшной полости. Небольшое ее количество может не давать симптомов, но увеличение жидкости ведет к растяжению брюшной полости и появлению дискомфорта, анорексии, тошноты, изжоги, болей в боку, респираторных расстройств.
Ценную информацию дает диагностический парацентез (50–100 мл); используют иглу 22 размера; выполняют пункцию по белой линии на 2 см ниже пупка или со смещением кожи в левом или правом нижнем квадранте живота. Обычное обследование включает осмотр, определение содержания в жидкости общего белка, альбумина, глюкозы, число клеточных элементов, цитологическое исследование, посев на культуру; иногда исследуют амилазу, ЛДГ, триглицериды, проводят посев на микобактерию туберкулеза. Изредка требуется лапароскопия или даже диагностическая лапаротомия. Асцит при ЗСН (констриктивный перикардит) может потребовать диагностической катетеризации правого сердца.
Выход жидкой части крови в интерстиций очага воспаления – собственно экссудация происходит вследствие резкого повышения проницаемости гистогематического барьера и как следствие усиления процесса фильтрации и микровезикулярного транспорта. Выход жидкости и растворенных в ней веществ осуществляется в местах соприкосновения эндотелиальных клеток. Щели между ними могут увеличиваться при расширении сосудов, при сокращении контрактильных структур и округлении эндотелиальных клеток. Кроме того, клетки эндотелия способны “заглатывать” мельчайшие капельки жидкости (микропиноцитоз), переправлять их на противоположную сторону и выбрасывать в близлежащую среду (экструзия).
Транспорт жидкости в ткани зависит от физико-химических изменений, происходящих по обе стороны сосудистой стенки. В связи с выходом белка из сосудистого русла, его количество вне сосудов увеличивается, что способствует повышению онкотического давления в тканях. При этом в очаге В. происходит под влиянием лизосомальных гидролаз расширение белковых и других крупных молекул на более мелкие. Гиперонкия и гиперосмия в очаге альтерации создают приток жидкости в воспаленную ткань. Этому способствует и повышение внутрисосудистого гидростатического давления в связи с изменениями кровообращения в очаге В.
Результатом экссудации является заполнение интерстициальных пространств и очага В. экссудатом. Экссудат отличается от трансудата тем, что содержит большее количество белков (не менее 30 г/л), протеолитических ферментов, иммуноглобулинов. Если проницаемость стенки сосудов нарушена незначительно, то в экссудат, как правило, проникают альбумины и глобулины. При сильном нарушении проницаемости из плазмы в ткань поступает белок с большей молекулярной массой (фибриноген). При первичной, а затем и вторичной альтерации проницаемость сосудистой стенки увеличивается на столько, что через нее начинают проникать не только белки, но и клетки. При венозной гиперемии этому способствует расположение лейкоцитов вдоль внутренней оболочки мелких сосудов и более или менее прочное их прикрепление к эндотелию (феномен краевого стояния лейкоцитов).
Раннюю транзиторную реакцию роста проницаемости сосудов обуславливает действие гистамина, ПГЕ, лейкотриена Е 4 , серотонина, брадикинина. Ранняя транзиторная реакция в основном затрагивает венулы с диаметром не более, чем 100 мкм. Проницаемость капилляров при этом не меняется. Действие экзогенных этиологических факторов механической (травма, ранение), термической или химической природы, вызывая первичную альтерацию, приводит к длительной реакции роста проницаемости. В результате действия этиологического фактора происходит некроз эндотелиалльных клеток на уровне артериол небольшого диаметра, капилляров и венул, что ведет к стойкому возрастанию их проницаемости. Отсроченная и стойкая реакция роста проницаемости микрососудов развивается в очаге В. через часы или сутки от его начала. Она характерна для В. , вызванного ожогами, излучением и аллергическими реакциями отсроченного (замедленного) типа. Одним из ведущих медиаторов этой реакции является медленно реагирующая субстанция анафилаксии (МРСА), которая есть не что иное как лейкотриены и полиненасыщенные жидкие кислоты, которые образуются их арахидоновой кислоты и фактора активации тромбоцитов (ФАТ). МРСА в очаге В. образуют и высвобождают лаброциты. Стойкий рост проницаемости микрососудов в очаге В. МРСА обуславливает, вызывая протеолиз базальных мембран микрососудов.
Биологический смысл экссудации как компонента В. состоит в отграничении очага В. через сдавление кровеностных и лимфатических микрососудов вследствие интерстиналльного отека, а также в разведении флогогенов и факторов цитолиза в очаге В. для предотвращения избыточной вторичной альтерации.
Виды экссудатов: серозный, гнойный, геморрагический, фиброзный, смешанный экссудат
Отличие экссудата от транссудата.
Транссудат - отечная жидкость, скапливающаяся в полостях тела и тканевых щелях. Транссудат обычно бесцветен или бледно-желтого цвета, прозрачный, реже мутноват из-за примеси единичных клеток спущенного эпителия, лимфоцитов, жира. Содержание белков в транссудате обычно не превышает 3%; ими являются сывороточные альбумины и глобулины. В отличие от экссудата в транссудате отсутствуют ферменты, свойственные плазме. Иногда качественные различия между транссудатом и экссудатом исчезают: транссудат становится мутноватым, количество белка в нем возрастает до 4-5%. В таких случаях важное значение для дифференциации жидкостей имеет изучение всего комплекса клинических, анатомических и бактериологических изменений (наличие у больного боли, повышенной температуры тела, воспалительной гиперемии, кровоизлияний, обнаружение в жидкости микроорганизмов). Для отличия транссудата от экссудата применяют пробу Ривальты, основанную на разном содержании в них белка.
Серозная жидкость скапливается в плевральных полостях (плевральная жидкость), полости брюшины (асцитическая жидкость) , в перикардиальной полости (перикардиальная жидкость) и извлекается с помощью пункции или разреза этих полостей. Для предупреждения, свертывания к исследуемой жидкости можно добавить 5% раствор цитрата натрия (2-5 мл раствора на 100 мл жидкости) или ополоснуть этим раствором стенки сосуда, в который будет собрана серозная жидкость. Для исследования в лабораторию направляют всю полученную серозную жидкость в чистой посуде. В зависимости от механизма образования различают два вида серозной жидкости - транссудат и экссудат.
Транссудат
Транссудат (невоспалительная жидкость) появляется при нарушениях общего и местного кровообращения (правожелудочковая недостаточность сердца, портальная гипертензия на почве тромбоза воротной вены, цирроза печени, адгезивного перикардита и др.), снижении онкотического давления в сосудах (гипопротеинемия различного происхождения), нарушении обмена электролитов (чаще всего при повышении концентрации натрия, увеличении продукции альдостерона) и др. Транссудат обычно светло-желтого цвета, прозрачен, его относительная плотность колеблется в пределах 1005-1015 (определяется так же, как и относительная плотность мочи, т. е. урометром). Количество белка в серозной жидкости определяют по помутнению, образующемуся при добавлении сульфосалициловой кислоты или по методу Брандберга - Робертса - Стольникова. В транссудате содержится от 5 до 10 г/л белка.
Экссудат
Экссудат - жидкость воспалительного характера. Серозный экссудат светло-желтого цвета, прозрачен. Во всех остальных случаях экссудат мутный, а цвет его зависит от характера (кровянистый, гнойный и др.). Относительная плотность экссудата 1,018 и выше. В нем содержится от 30 до 80 г/л белка.
Различить транссудат и экссудат не всегда легко, так как встречаются жидкости, близкие по своим свойствам и экссудату, и транссудату, и экссудат с низкой относительной плотностью и сравнительно небольшим содержанием белка. Для дифференциации этих жидкостей используют реакцию Ривальты.
Методика. Узкий цилиндр емкостью 200 мл заполняют водой, добавляют 2-3 капли ледяной уксусной кислоты и размешивают. Затем из пипетки в полученный слабый раствор уксусной кислоты вносят 1-2 капли исследуемой жидкости и следят на черном фоне за появлением облачковидного помутнения, напоминающего дым сигареты. В экссудате помутнение по мере опускания капли увеличивается и доходит до дна цилиндра (положительная реакция), в транссудате легкое помутнение рассеивается и исчезает, не доходя до дна цилиндра (отрицательная реакция).
После отстаивания доставленной на исследование серозной жидкости в течение
1-2 ч стеклянной трубочкой собирают осадок для центрифугирования (как при исследовании мочи). Если жидкости много, то осадок собирают в несколько центрифужных пробирок (до 10). После центрифугирования в течение 5-10 мин при 1500-3000 об/мин все полученные осадки сливают в одну пробирку и опять центрифугируют. В результате получают концентрированный осадок, из которого" готовят нативные препараты для микроскопического исследования.
Если в жидкости имеются фибринозные свертки, клочки или сгустки, то в анализе описывают их количество и объемность. Свертки и клочки отбирают узким шпателем и иглой из жидкости, отлитой в чашку Петри, а затем от них отщепляют кусочки для приготовления нативных препаратов, так как форменные элементы обычно находятся в свертке. Сверток, помещенный на предметное стекло, растягивают иглой и шпателем. В противном случае получится толстый препарат, непригодный для микроскопического исследования (форменные элементы будут в нем неразличимы).
После микроскопического изучения нативные препараты окрашивают по Романовскому - Гимзе или по Паппенгейму. Время окраски - не более 5 мин. При наличии серозной жидкости гноя из осадка готовят мазки для окраски по Цилю - Нильсену и по Граму.
Виды экссудата
В зависимости от вида патологического процесса выделяют различные виды экссудата.
Серозный и серозно-фибринозный экссудат
Серозный и серозно-фибринозный экссудат наблюдается при стафилококковой, стрептококковой инфекциях, туберкулезе, сифилисе, ревматизме. В серозно-фибринозном экссудате обычно присутствуют фибринозные свертки. При микроскопии выявляют небольшое количество клеточных элементов. Преобладают лимфоциты. Иногда обнаруживается значительное количество либо нейтрофильных гранулоцитов, либо моноцитов, либо макрофагов, либо эозинофильных гранулоцитов, либо всех перечисленных элементов в любом соотношении. При затяжной форме плеврита цитограмма характеризуется наличием плазматических клеток. Нередко в начале туберкулезного плеврита выявляется пестроклеточная картина цитограммы (эозинофильные и нейтрофильные гранулоцнты, гистиоциты, элементы туберкулемы и др.), в силу чего его иногда приходится дифференцировать с лимфогранулематозом.
Серозно-гнойный и гнойный экссудат
Серозно-гнойный и гнойный экссудат мутный, густой, зелено-желтого, иногда буроватого или шоколадного цвета; наблюдается при бактериальной инфекции. Цитограммы характеризуются большим количеством нейтрофильных гранулоцитов, часто с дегенеративными изменениями, наличием макрофагов, единичных гигантских клеток инородных тел и детрита.
Гнилостный экссудат
Гнилостный экссудат отличается гнилостным запахом, зеленоватым цветом. В цитограммах большое количество детрита распавшихся клеток, иглы жирных кислот, иногда обнаруживают кристаллы гематоидина и холестерина, много микроорганизмов, в том числе и анаэробных.
Эозинофильный экссудат
Эозинофильный экссудат характеризуется большим количеством эозинофильных гранулоцитов, которые могут достигать более 90 % клеточного состава выпота. Наблюдается иногда при туберкулезе или других инфекциях, абсцессе, травмах, множественных метастазах рака в легких, миграции личинок аскарид в легкие и др. По характеру эозинофильный экссудат может быть серозным, геморрагическим и гнойным.
Геморрагический экссудат
Геморрагический экссудат появляется при мезотелиоме, метастазах рака, геморрагическом диатезе, ранениях грудной клетки. При проникновении инфекции в полость с геморрагическим экссудатом он может превращаться в гнойно-геморрагический. Примесь гноя в экссудате выявляют с помощью пробы Петрова: при добавлении воды стерильный экссудат просветляется из-за гемолиза эритроцитов, а инфицированный остается мутным из-за присутствия лейкоцитов.
При микроскопическом исследовании обращают внимание на эритроциты. Если кровотечение уже прекратилось, то можно выявить лишь старые формы эритроцитов с различными признаками их гибели (микроформы, «тутовые ягоды», тени эритроцитов, пойкилоциты, шизоциты, вакуолизированные, фрагментированные эритроциты и др.). Появление неизмененных эритроцитов на фоне старых, измененных, свидетельствует о повторном кровотечении. Наличие только неизмененных эритроцитов указывает на свежее кровотечение. При переходе геморрагического экссудата в гнойный или другой вид появляются соответствующие клеточные элементы. В периоде рассасывания геморрагического экссудата иногда до 80 % его клеточных элементов составляют эозинофильные гранулоциты, что является благоприятным признаком.
Холестериновый экссудат.
Любой осумковавшийся экссудат при длительном существовании (несколько лет) может превратиться в холестериновый. Холестериновый экссудат густой, желтоватого или буроватого цвета, с перламутровым блеском, иногда шоколадного цвета (в зависимости от количества распавшихся эритроцитов). На стенках пробирки, смоченной экссудатом, макроскопически видны слепки кристаллов холестерина в виде мельчайших блесток. При микроскопическом исследовании выявляют жирно-перерожденные клетки, продукты клеточного распада, капли жира и кристаллы холестерина.
Молокообразный экссудат.
Различают три вида такого экссудата.
Хилезный экссудат появляется при попадании значительного количества лимфы из крупных лимфатических сосудов в серозную полость. Эта жидкость содержит большое количество мелких капелек жира, который окрашивается Суданом III в красный цвет и осмием - в черный. При стоянии в жидкости образуется сливкообразный слой, всплывающий кверху.
Для просветления жидкости к экссудату добавляют 1-2 капли едкой щелочи с эфиром. В зависимости от причины, вызвавшей разрыв лимфатического сосуда, клеточные элементы экссудата могут быть различными. Если опухоль проросла в сосуд и разрушила его, то в жидкости можно обнаружить и опухолевые клетки.
Хилусоподобный экссудат наблюдается при интенсивном распаде жирно-перерожденных клеток. При микроскопическом исследовании в нем обнаруживают обилие жирно-перерожденных клеток, жировой детрит и жировые капли различной величины. Микрофлора отсутствует. Хилусоподобный экссудат наблюдается при хроническом гнойном плеврите, атрофическом циррозе печени, злокачественных новообразованиях и др.
Псевдохилезный экссудат макроскопически также напоминает молоко, но взвешенные в экссудате частицы не окрашиваются Суданом III и осмием и не растворяются при нагревании. При микроскопии выявляют мезотелиоциты и единичные жировые капли. Встречается псевдохилезный экссудат при липоидной и липоидно-амилоидной дегенерации почек.
Руководство к практическим занятиям по клинической лабораторной диагностике / Под ред. проф. М.А. Базарновой, проф. В.Т. Морозовой.- К.: Выща школа, 1988.- 318 с., 212 ил.
